Новые возможности применения метода хемилюминесценции для оценки свободно-радикального окисления при псориазе

ГБОУ ВПО "Смоленская государственная медицинская академия" Минздравсоцразвития РФ

Смоленск

Белявская А А
Торшина И Е

Актуальность. Контроль течения псориаза, характеризующегося хронизацией и рецидивированием с различной степенью тяжести, является целью оказания медицинской помощи больным с данной патологией. Одним из ранних признаков воспалительного процесса в преморбиде псориаза является изменение параметров интенсивности свободно-радикального окисления (СРО). «Готовность» к воспалению и увеличению интенсивности СРО при псориатической болезни может быть выявлена на любом участке кожи и/или её дериватов при отсутствии явных клинических проявлений болезни. Нередко, единственным симптомом болезни являются различной формы дистрофии ногтей. Оценка интенсивности СРО в ногтевых пластинках при псориазе могла бы явиться реальной возможностью определения прогноза течения псориаза для своевременной коррекции лечения. Цель: разработка объективного, количественного, неинвазивного экспресс-метода диагностики псориаза с использованием хемилюминесценции экстрактов ногтевых пластин. Материалы иследования. В исследовании приняли участие 2 группы лиц: 1. больные различными формами псориаза в возрасте от 18 до 40 лет (25 человек); 2. контрольная группа сравнения из числа практически здоровых доноров (38 человек). Материалом для исследования послужили свободные дистальные участки ногтевых пластинок кистей размером не менее 5 мм. Методика исследования. Полученный материал (ногтевые пластинки) измельчали, кипятили на водяной бане в течение 10 минут в присутствии 5 мл дистиллированной воды и 1 мл 95% этилового спирта. После фильтрации через фильтровальную бумагу, 200 мкл образовавшегося раствора помещали в кювету хемилюминесцентной установки с добавлением 200 мкл фосфатного буфера (20мМ КН2РО4, 10 мМ КСl pH 7,4). Для инициации хемилюминесценции вводили 50 мкл FeSO4 7H2O, на 7-ом цикле вводили 100 мкл 3% H2O2. Регистрировали хемилюминесценцию в течение 20 циклов и рассчитывали: 1) высоту медленной вспышки – Ф макс, которая отражает максимально возможную интенсивность перекисного окисления после введения H2O2; 2) светосумму – S, которая позволяет оценивать число новых цепей разветвления; 3) тангенс угла подъема и спада, характеризующий скорость окисления. На основании полученных данных рассчитывали в относительных единицах коэффициент Н, где Н=S/Ф макс . Результаты. Установлены достоверные, статистически значимые (р ≤ 0,5) различия в активации СРО в ногтевых пластинках у больных псориазом (1 группа) и здоровых лиц (2 группа). У больных псориазом коэффициент Н составил 4,49±,013 в сравнении с результатом коэффициента Н у здоровых лиц - 4,24±0,09. Выводы. Хемилюминесцентный анализ ногтевых пластинок является простым и экономичным в исполнении, количественным, неинвазивным экспресс-методом определения интенсивности процессов СРО у пациентов с псориазом для оценки степени тяжести и прогнозирования течения болезни.